B グループの SDS-PAGE の結果を載せます。
このページから写真を自分の PC に保存して，レポートに使って下さい。
レポートには，高画質版のデータを使って下さい。ページの下の方にリンクがあります。
（リンクを左クリックして，写真の上で右クリックすれば保存に進めます）
いろいろなことが読みとれます。どれだけのことを学んだか，レポートでしっかり報告してください。
レポートを書くときには，自分のグループのデータだけじゃなく，他のグループのデータについても
考察してください。グループによって結果に違いがありますね。教材としてとても面白いです。
ふじわら 先生からのレポート課題 2 の実践編になります。
染色に使った溶液は以下の通りです。
＊ 染色液： クマシーブリリアントブルー（Coomassie Brilliant Blue: CBBと略す）
45% エタノール（v/v），10% 酢酸（v/v） に対して，クマシーブルーの粉を 0.25% に
溶かしたものです。
＊ 脱色液： 25% メタノール（v/v），10% 酢酸（v/v），2.5% グリセリン（v/v） です。
【手順】
（1） 泳動後のゲルをゲル板から外し，CBB 染色液に浸ける。
これは実習の最後に自分たちの手でやりました。
（2） 染色時間を短縮するために電子レンジ１分くらい加熱。
（急がないなら，シェイカーでゆっくり揺すりながら，室温に 数時間置く。）
（3） 染色液をビンに戻し，ゲルを水道水で洗う （水が青くならなくなるまで）。
（4） 脱色液に浸け，ゆっくり揺すりながら，室温で数時間置く （バンドがはっきりと
見えてくるまで）。
（5） 10% 酢酸水溶液に浸け，室温で静置する （ゲルのバックグラウンド＝背景の
青い色がすっかり抜けるまで）。
染色直後のゲル ゲル全体が真っ青で，タンパク質がよく見えません。
M レーンでは，マーカーを電気泳動しました。各バンドの分子量がいくらかは，実験室で
配った資料を参考にしてください。
※注意！
全てのゲルの写真の中にひときわ目立つ極太のバンドがあります。
写真のMレーン中で「※印」で示した大きさの位置にあるバンドです。
a → b → c → d と順に薄く細くなっていきますが，「d」 にも見えます。
このバンドは，EGFP ではありません！
このバンドの正体は，大腸菌からタンパク質を取り出す時につかった
リゾチームという酵素（タンパク質）です。この酵素で大腸菌の細胞壁を壊し，
大腸菌からタンパク質を取り出しやすくします。 つまり，この大量に見えて
いるタンパク質は，大腸菌自身が作ったタンパク質ではありません。
けれど，アフィニティクロマトグラフィーの仕組みを考えれば，EGFP の精製
を邪魔しないので，あっても問題ないです。 溶出液 「d」 のレーンで見えて
しまっているのは，量が多すぎて，しっかり洗いきれなかったことが原因です。
なので「※」の位置のバンドについては，それほど頭を悩ませなくて大丈夫です。
それ以外のバンドをよく見ましょう。
もしも，この web ページや授業で手に入れた情報以外で，考察のために欲しい情報が
あれば，是非問いあわせて下さい。（課題の答えは教えてあげませんが，ヒントになりそう
なことは教えてあげます。重要だと思ったヒントは，全員に教えてあげます。）
わからないことがあれば，砂長か藤原先生か TA まで，いつでも質問に来てください。